Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中慢慢扩展

从第一次消失家兔自身血清到消失1HG白血病医学呕吐的成效百余人在孩童时期就有很好的描绘出，多个家兔自身血清阳性的孩童中的有70%在血清转换后10年内患上白血病，而随访15年的孩童这一比例上升到84%。比起之下，占医学1HG白血病一半以上的HG1HG白血病的胃癌机制还没得到充分的数据深入研究。

越来越多的人开始用于分段系统来定义1HG白血病的成效：幼质在消失多种家兔自身血清时转入第1过渡期，消失胰岛素间歇性时转入第2过渡期，消失呕吐时转入第3过渡期。一些多发家兔自身血清阳性的幼质，在1期和2期，成效较慢，并发展为胃癌的1HG白血病。我们在此之前描绘出了四两组在首次侦测到多种家兔自身血清样品后有数10年无白血病的极慢成效者，这两组病患人数多于，但相异之处非常明确。随后，我们发现家兔自身抗原酪氨酸CD8+T细胞内加成在成效比较慢的病患中的基本不发挥作用，但在近期胃癌和长期发挥作用的白血病病患中的很更易侦测到。这意味著表明，与成效病患比起，这些病患性疾病的调节增强。

后期数据深入研究表明，尽管调节性T细胞内(Treg)数量正常，但白血病病患发挥作用一些功能性缺陷，其中的包括对IL-2的加成潜能降低。此外，白血病病患中的的现象以CD4+T细胞内意味著对调节更具抵抗性，展现出为现象以T细胞内的可抑制减弱，自然地产生的Treg和质外产生的正向Treg，以及抗原经历的CD4+T细胞内中的IL-2加成减弱。本数据深入研究的用意是描绘出了CD4+调节性T细胞内(Treg)在一小群极比较慢成效者中的的相异之处，他们的年长为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

法则：BOX数据深入研究是一项以人群为基础的纵向数据深入研究，在21岁表列肺炎的病患亲属中的检查1HG白血病的危险因素所。我们在此之前描绘出了长期比较慢成效者的相异之处，他们保持多重家兔自身血清阳性多达10年，但没消失白血病的医学呕吐，慢性或非顺利完成性性疾病。随后，10名再次保持无白血病并愿意提供者大量血液样品的比较慢成效者纳入T和B细胞内功能性深入研究。在目前的数据深入研究中的，8名慢成效者(SP两组)，中的位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的家兔自身血清阳性。所有的参与者都处于1HG白血病成效的1期，尽管一些人随后失去了家兔自身血清对某些抗原的阳性加成，然而，一名病患从未处于2期有数6年，但没消失医学呕吐，一名病患被治疗为白血病，该病人72岁，在通过观察实验样品时，其HbA1c上升到53 mmol/mol(7%)，在数据深入研究中的对该供质顺利完成了单独评量。分立外周血单个核细胞内(PBMCs)，采用多参数流式细胞内精和T细胞内可抑制试验评量供质中的Treg的频百余人、表HG和功能性。用于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、表征和复出)顺利完成无行政官员聚类深入研究，评量Treg表HG。

结果：与保健供质比起，来自慢成效质的梦境CD4+T细胞内的行政官员聚类揭示，激活的梦境CD4+ Treg频百余人上升，与糖皮质激素正向的TNFR相关蛋白(GITR)暗示上升有关。一名HbA1c上升的病患与成效比较慢者和反之亦然的相异两组比起，Treg谱有所相异。功能性深入研究表明，与保健供质比起，来自比较慢成效质的Treg介导的CD4+现象以T细胞内可抑制值得注意受损。展现出为对现象以CD4+T细胞内CD25和CD134暗示的可抑制上升。

绘出1 深入的表HG深入研究揭示，CD4+Treg亚HG在慢成效队列中的上升。由FlowSOM填充的Treg室，聚集在来自所有供质的活CD4+CD45RA -细胞内上。根据记号物暗示鉴定出10个元簇:梦境T细胞内_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;梦境T cell_4;CD49b梦境T细胞内;HLA-DR + GITR +梦境T细胞内;文件系统Treg_1;文件系统Treg_2;文件系统Treg_3;和文件系统Treg_4。(a)用于9个相异Treg记号填充的10个元簇的MST。每个节点象征性一个一个大(100个一个大)，巨大的元一个大(10个元一个大)在节点两组周围打磨。每个节点中的的年糕绘出对此单个记号的暗示级别。(b)每个元聚类的热绘出，以揭示整质记号暗示。(c, d)为HD两组(c)和SP两组(d)填充绘出，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)比起数量级为每个metacluster箱子终点站绘出(数量级> 0.05%)确定为HD和SP两组:文件系统Treg_2 (e),文件系统Treg_3 (f),文件系统Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +梦境T细胞内(h)、梦境T cell_1(i),梦境T cell_2 (j),梦境T cell_3 (k) n d CD49b梦境T细胞内(l)。深深蓝色橘色象征性捐**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对小写字母秩验。此键适用于绘出形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

绘出2 用于CITRUS的预测确认，Treg频百余人的上升是成效比较慢的标志。分级除此以外(a - f)和柑橘深入研究(g-k)相比较SP参与者和反之亦然的HD参与者在CD4+CD45RA−T细胞内上的不同。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群质的象征性性绘出。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3可溶性，然后通过HLA-DR和GITR暗示顺利完成分立，模拟器FlowSOM群质。(b) HD(白斑)和SP(蓝点)两组以及供质SP 606(深深蓝色)中的CD25+ cd127的频百余人统计绘出。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+除此以外子集的箱子终点站绘出;(c) HLA-DRloGITR−(文件系统Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(文件系统Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(文件系统Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+文件系统T cell)。(g - i)甜菜簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3暗示强度渐变，箭头突出的簇被识别为SP和HD队列之间的相异。(j)箱子终点站绘出揭示了在SP(蓝点)和HD(灰点)两组中的，CITRUS梦境Treg_3和Treg_4的比起数量级(比例)。(k)直方绘出揭示每个簇的表HG(紫色)和Treg记号比起暗示与时代背景暗示(深蓝色);上列，文件系统Treg_3;下面一行，文件系统Treg_4。时代背景与所有其他簇中的记号的暗示有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对小写字母秩验

绘出3 与保健献血者比起，成效比较慢者梦境treg的GITR上升。每个梦境CD4+T细胞内元簇(梦境T细胞内_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;CD49b +梦境T细胞内;HLA-DR + GITR +梦境T细胞内;文件系统Treg_2;文件系统Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)侦测每个暗示记号的改变。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的暗示热绘出(sp606不包括在内)。(c,d)梦境Treg_4元簇中的所有HD(紫色)、所有SP(深蓝色)和SP 606(深深蓝色)的FlowSOM GITR暗示串连，揭示直方绘出(c)和统计绘出(d)。Wilcoxon配对小写字母秩和验，p< 0.07(深深蓝色)所有供质包括，p< 0.05(深蓝色)供质SP 606和反之亦然的HD不包括在测试中的。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中的GITR暗示，从分级除此以外，从所有HD(紫色)、所有SP(深蓝色)和SP 606(深深蓝色)串连，揭示直方绘出(e)和统计绘出(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对小写字母秩验

绘出4 来自比较慢成效的CD4+ treg细胞内控制现象以CD4+T细胞内的潜能降低。SP两组用深蓝色的终点站和橘色对此，HD两组用紫色的终点站和橘色对此，深深蓝色的终点站/橘色对此供质sp606。用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内顺利完成分选。CD4+CD25−(应以答者)被记号为CFSE, Treg按观察的比例反应物。用抗CD3 /28微珠诱导细胞内，人才培养3天后顺利完成流式细胞内精侦测。(a-d)与CD4+应以答者比起应以的treg人才培养(自质)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD应以答者人才培养。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE可抑制多于(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的可抑制多于。用于阳性相异(激活的作出加成细胞内不含treg)计算可抑制多于。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差深入研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相比较测试

绘出5 现象以CD4+T细胞内对比较慢成效的T细胞内诱导的可抑制更敏感性。SP两组用深蓝色的终点站和橘色对此，HD两组用紫色的终点站和橘色对此，深深蓝色的终点站/橘色对此供质sp606。用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内顺利完成分选。CD4+CD25−(应以答者)被cfsel记号，treg按观察的比例反应物。用抗CD3 /28微珠诱导细胞内，人才培养3天后顺利完成流式细胞内精(CD25反染)和细胞内因子深入研究。HD Treg与HD、SP或sp606应以答者共同人才培养。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE可抑制百分百余人(b)。(c,d) CD25可抑制百分百余人(c)和CD134可抑制百分百余人(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共人才培养中的的暗示。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差深入研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相比较测试

推论：我们得出的推论是，来自比较慢成效子的诱导梦境CD4+Treg在GITR暗示中的得到了延展和丰富，强调了更进一步数据深入研究Treg在1HG白血病可能会幼质中的的异质性的更更进一步。

原文出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28